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包膜病毒

同时还避免了因整合而引发的 潜在的基因突变和随机效应

  慢病毒,腺病毒,逆转录病毒三种病毒表达系统的区别慢病毒表达系统 一种很常用的哺乳动物病毒表达系统;慢病毒感染宿主细胞时,可将携带的外源 基因随机、稳定地整合入宿主细胞基因组中,实现目的基因稳定、长期的表达, 非常适合于基因过表达稳定细胞株的建立和RNAi 研究。 腺病毒表达系统 一种很常用的哺乳动物病毒表达系统;但与慢病毒不同的是,腺病毒基因组及其 携带的外源基因不会整合入宿主细胞的基因组中,而是游离于宿主基因组外独立 表达,因此可实现目的基因瞬时、高丰度的表达,同时还避免了因整合而引发的 潜在的基因突变和随机效应,安全性和可控性高。 逆转录病毒表达系统 逆转录病毒将自身基因组及其携带的外源基因随机、稳定地整合入宿主细胞基因 组中,可实现目的基因稳定、长期的表达逆转录病毒表达系统根据不同的包装细 胞系可分为单嗜性、双嗜性和泛嗜性,不同包装细胞产生的逆转录病毒能够特异 性地感染某一个或某一类宿主细胞。辉骏生物采用的病毒包装细胞系为plat 细胞系,该细胞系包含gag、pol和env 基因,因此转染单一表达质粒就可以包 装出逆转录病毒,但是该病毒具有很强的针对性,只适用于大鼠、小鼠细胞稳定 株的建立。 三种病毒表达系统的特点 慢病毒表达系统 腺病毒表达系统 逆转录病毒表达系统 病毒基因组 RNA DNA RNA 病毒原型 人类免疫缺陷I 型病毒 (HIV) 型腺病毒(Ad5) 莫洛尼鼠白血病病毒 (MMLV) 载体系统 个表达质粒和3个包装 质粒 个穿梭质粒和1个辅助质 个表达质粒包装细胞 293T 细胞 293 细胞 plat 细胞包装方式 表达质粒与辅助质粒共转 染包装细胞获得重组慢病 毒颗粒;包装细胞不裂解, 病毒被分泌至上清中 表达质粒与辅助质粒共转染 包装细胞获得重组腺病毒颗 粒;病毒感染后包装细胞发 生裂解。 表达质粒转染含所有必需蛋 白的包装细胞即可获得重组 病毒颗粒;包装细胞不裂解, 病毒被分泌至上清中 宿主细胞 分裂和非分裂的哺乳动物 分裂和非分裂的哺乳动物细 分裂的大鼠、小鼠细胞 细胞 动物模型可获得转基因动物,效果 不能得到转基因动物可以实现,但较有难度 是否整合 整合型 非整合型 整合型 表达丰度 高水平表达 高水平表达 高水平表达 表达时间 病毒滴度1108~11010 TU/mL 11011~11013 vp 1106~1107 TU/mL 克隆容量 最高可达6kb 的外源片段 高达8kb 的外源片段 不超过6kb 的外源片段 免疫原性 过表达microRNA 特别适合 适合 不适合 RNAi 特别适合 适合 适合


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